方法多诊断难XpertMTBRIF实现

北京那家治白癜风治得好 https://yyk.39.net/bj/zhuanke/89ac7.html
作者：沈佳瑾周春妹单位：医院检验科结核分枝杆菌结核分枝杆菌（MycobacteriumTuberculosis，MTB），俗称结核杆菌（Tuberclebacillus），其感染是威胁人类健康的公共卫生问题之一。结核病的早期确诊是患者得到及时救治以及减少MTB传播的重要基础。实验室检查在结核病确诊中发挥关键作用，尽管针对MTB的实验室检查种类较多又各有所长，但有时依然难以明确诊断。下文就是这样一个肺结核疑似患者的确诊之旅。案例经过该患者同时送检了痰抗酸涂片、痰分枝杆菌液体培养以及全血T-SPOT.TB检测。结果如下：1.痰涂片未见抗酸杆菌。2.痰分枝杆菌液体培养第7天报阳。阳性培养物在液体培养管（MGIT）内呈颗粒状（图1左），符合分枝杆菌的生长特点；阳性培养物的抗酸染色镜检呈现条索状（图1右），提示MTB可能性大。图1：患者阳性培养物外观及抗酸染色镜检为了进一步鉴别阳性培养物里是MTB还是非结核分枝杆菌（Nontuberculosismycobacteria，NTM），我们使用了结核分枝杆菌抗原检测试剂盒（胶体金法）。该试剂盒可检测MTB生长繁殖过程中所分泌的特异性蛋白质MPB64，用于区分MTB和NTM。该标本两次MTB抗原检测结果均为阴性。3.T-SPOT.TB检测结果阳性。ESAT-6（抗原A）85、CEP-10（抗原B）62（参考值：抗原A6、抗原B6），提示MTB感染。综合上述检测结果：阳性培养物的抗酸染色镜检形态以及T-SPOT.TB检测结果均提示MTB感染，但MTB抗原检测却是阴性。面对这种多项检测结果不一致的情况，我们是否可以根据抗原检测结果判读为NTM，还是要做进一步检测？案例分析我们首先通过查阅资料，发现MTB抗原检测（胶体金法）在以下情况中会出现假阴性：1.样本中MPB64浓度低于试剂盒检出限；2.牛分枝杆菌（M.bovis）BCG的几种亚株不产生MPB64蛋白；3.MPB64编码基因突变[1]。这虽能对MTB抗原检测阴性的结果做出解释，但依然不能确定阳性培养物菌体是否为MTB。还能再增加什么检测项目做进一步确认呢？最后，我们建议该患者增加MTB核酸检测——XpertMTB/RIF检测，阳性培养物和患者痰液样本结果显示为阳性（图2）。图2：患者痰液样本的XpertMTB/RIF检测结果这与临床同份痰液样本的二代测序（mNGS）结果（图3）一致，检出结核分枝杆菌复合群的核酸序列而未检出NTM的核酸序列。结合患者的临床表现和影像学检查结果，最终该患者被诊断为结核病。图3:患者同份样本的二代测序结果什么是XpertMTB/RIF检测？XpertMTB/RIF是通过检测MTB基因组中的rpoB基因及其突变情况，实现MTB核酸和利福平耐药检测的半巢式全自动实时荧光定量核酸扩增技术。该技术具有以下优势：特异性好特异性近%[2]，能准确区分MTB和NTM。灵敏度高敏感性约53.54%[2]，比涂片法和培养法更敏感。检测快速完成检测仅需2小时。相比液体培养法耗时3~45天以及mNGS耗时约30小时，能有效缩短检测时间。适用广泛痰液、肺泡灌洗液、肺组织、脑脊液、淋巴结、关节液以及尿液等均可用于检测。同时检测利福平耐药检测对一线抗结核药物利福平的耐药情况，敏感性约97.6%，特异性约98.1%[3]，可及时为临床用药提供有效参考。MTB核酸检测助力结核病诊断病原微生物学检测是确诊结核病的重要依据，传统的病原微生物学检测包括涂片法和培养法。涂片法价格低廉、操作简单，但敏感性差；培养法是结核病诊断的金标准，但由于检测周期过长，不能为临床提供有时效性的检测结果。而MTB核酸检测作为一种分子生物学技术，能够在一定程度上弥补传统检测方法的不足。图4：MTB多种病原微生物学检测方法的优缺点在年发布的《中华人民共和国卫生行业标准——肺结核诊断》中[4]，将MTB核酸检测阳性及肺部影像学检查支持纳入肺结核的诊断标准，这是对核酸检测在肺结核诊断中应用价值的高度认可。作为MTB核酸检测的方法之一，XpertMTB/RIF被世界卫生组织（WorldHealthOrganization，WHO）推荐应用于肺结核、肺外结核及儿童结核的诊断[5]。随着分子生物学的发展，核酸检测技术在病原学诊断和耐药性检测中应用广泛。XpertMTB/RIF在检测MTB感染中具有精准快速的突出优势，能够为临床医生诊疗结核病提供强有力的支持。编辑：yeah审校：小冉预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇

转载请注明：http://www.shijichaoguyj.com/wxjq/11722.html