不会R语言做生信,genespring
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之前的课程中,我们通过数据库拿到了免费的数据,今天我们就开始分析它们了,这个过程就叫做“数据挖掘”。
首先介绍下基因芯片软件和工具。基因芯片分析一般对硬件要求不高,普通的PC机就能运行,但如果处理较多的数据量时,建议提高内存,如果拥有16g内存和i7的处理器基本就能快速运行所有分析了。目前基因芯片的分析工具很多,但各有优缺点。根据难易程度推荐以下三款软件和工具。
GeneSpring优点:互动式的视窗操作界面,傻瓜式操作,功能强大,拥有超过篇的高水平参考文献的引用,表达谱数据分析的金标准。缺点:商业软件收费,操作繁琐,功能拓展性差。如同SPSS一样,适用于零基础的鞋同。.BRB-Array优点:基于excel的分析工具,自动调用R包,功能强大,拓展性强,操作简单,免费使用。缺点:专业性强,格式要求高,稍有不符就报错。适用于有一定基础且对英文说明书研究要透彻。R—Bioconductor优点:R语言,生信必学的分析工具,强大的统计分析和作图工具,集合了几乎所有和最新的分析算法和工具包,任你免费调用。缺点:对于拥有安装某个R包就研究几天经历的鞋童们就不用多说了吧!那么便于零基础的鞋童这里采用GeneSpring进行分析。我们以上次讲到的GSE为例90个样本,从cel文件开始分析。GeneSpring界面
新建项目,命名
新建实验,命名
选择芯片平台,即哪家公司的哪类产品。
选择高级分析,点击ok
选择文件,导入cel文件
输入arr文件,不用输入跳过这步点next
选择算法,从还原文献中得知采用RMA。一般选择中位数作为基线
点击完成后,运行。最终生成了一个个探针*90个样本的矩阵格式形式了
接下来就是导入平台注释文件,告诉你这些探针号代表的基因是什么
导入对应的上期所讲的平台注释txt文件
记得打开它,把多余的标题删除,保持也是矩阵形式选择你要匹配的id和注释的信息。根据文献,我们就选择ID,GeneSymbol,ENTREZ_GENE_ID和GeneTitle。当然也可以选择更多信息来注释你的探针
这样就完成注释了
最后就是要输入样本的分组信息。只有知道样本的分组信息才能进行统计,没有比较就没有差异
添加一个分组变量,命名type,非数值型
根据实验分组信息,对具体样本编号进行hcc,hcc-icc,icc分组
然后点击createinterpretation来进一步描述统计目的
选择不连续变量
选择包含三个分组,取均值
产生了三组的图谱。可以指针悬停看什么基因
接下来是统计,可以进行三组检验的各种统计分析
如果只想进行两组(例如hcc和icc)的检验。那么重新createinterpretation,只选择hcc和icc。这里举例hcc和icc,用非配对的t检验
根据你不同的目的选择不同的统计方法
设定p值的阈值
筛选出个探针,p0.05
接下来再根据差异倍数进一步筛选
选择HCCvICC
选择2倍差异阈值
总共个探针,至少两倍差异,p0.05被筛选出来了
右击鼠标导出数据
打开txt,就得到最终的详细列表
最后可以通过txt导入excel,进一步整理成发表论文的表格,这样就大功告成了。
这期就到这里了,下期将进一步实现如何把不同类型的芯片数据集整合在一起,即还原文献中以下这段过程。
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