搞科研,当然要追热点丨临床科研
想要文章接收快,除了实验设计完整、逻辑清晰、内容丰富而有意义等等等等……还有最最最重要的一点就是要了解科研最新热点,掌握最新研究进展。那么最近几年基础科研的研究热点是什么?那必须要有微环境、生物标志物、生信分析、microRNA、lncRNA和外泌体等等,现在就来跟大家分享一篇今年刚发表的3分文章,结合了肿瘤微环境、lncRNA和生信分析等热点,希望对大家能有一点点的帮助!
照片来源于网络研究思路
下图是作者的数据分析流程和研究思路:图A通过分析36例RNA测序数据和TCGA数据库的54例RNA测序数据来鉴定肺癌细胞的外源性lncRNA;图B从肺肿瘤样品分离出免疫细胞的单细胞并作RNA测序分析;图C在健康的血液中分离出免疫细胞的单细胞并作RNA测序分析;图D通过免疫激活和基于siRNA的测定评估体外lncRNA的抗肿瘤活性。
实验方法
收集36例肺癌及其癌旁组织样本,做RNA测序,并通过TCGA数据库分析54例肺癌患者的外源性lncRNA。通过体外细胞毒性测定、siRNA和qPCR实验验证结果。
结果解读
1、表1为病例的具体情况。
2、肺癌RNA测序数据含有外源性lncRNA
作者从RNA测序和TCGA数据库中,挑出前10位在肺癌和正常组织差异最明显的lncRNA(表2),前10位与PTPRC(白细胞标志物)正相关的lncRNA(表3),前10位与LUMP(肿瘤中免疫细胞浸润的标志物)得分呈负相关的lncRNA(表4)。结果表明,RNA测序检测出了外源性的lncRNA,这些外源性的lncRNA可能是浸润在肺癌的免疫细胞产生的。
3、肺肿瘤微环境中免疫细胞的LncRNA表达
作者将肿瘤组织和正常组织的RNA测序数据作比较,结果发现相较于正常组织,肺癌中LINC的表达水平较低。将分选的免疫细胞进行RNA测序,结果发现linc主要在免疫细胞中表达,与LUMP得分呈负相关。且linc表达的较低的患者显示5年总生存期明显较差。
4、LncRNA在正常的免疫细胞中表达
作者从数据库GSE中的数据分析发现lncRNA在正常的免疫细胞中表达,且在不同的免疫细胞表达有一定的差异性。
5、为了研究外源的lncRNA在抗肿瘤免疫中的作用,作者鉴定了位于19q13.41染色体上的个碱基对AC.1非编码转录本。发现此转录本仅在健康CD8+T细胞和NK细胞中表达,作者同时分析了与AC.1相关的NKG7和SIGLEC10的表达情况,结果表明AC.1与NKG7之间可能存在顺式调节关系。
6、最后作者通过细胞毒性实验和敲低AC.1,验证AC.1的表达降低与NK细胞功能受损有关,表明免疫细胞中lncRNA的表达可影响NK细胞的抗肺肿瘤反应。
小结
这篇文章主要通过收集的病例样本进行RNA测序和数据库的生信分析实验来表明lncRNA在健康和浸润肿瘤的人类免疫细胞中广泛表达。最后通过数据库和基础实验表明lncRNA可作为肺癌肿瘤免疫反应的新型介体。
这篇文章虽然数据看起来很多,但是多为生信分析,实际实验并不多,且研究内容较浅,而作者紧追热点,如肿瘤微环境和lncRNA等。我们在科研的同时要了解科研的最新热点,掌握最新研究进展,且尽量让研究与热点相结合,这样不但会让我们的文章尽快被接收,也可能助文章更上一层楼。
参考文献:SageAP,NgKW,MarshallEA,etal.Assessmentoflongnon-codingRNAexpressionrevealsnovelmediatorsofthelungtumourimmuneresponse.SciRep.;10(1):.PublishedOct9.doi:10./s---6
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